تانک الکتروفورز | Electrophoresis Tank

تانک الکتروفورز | خرید تانک الکتروفورز | فروش تانک الکتروفورز | قیمت تانک الکتروفورز | خرید | فروش | قیمت | خرید | خرید | خرید | خرید تانک الکتروفورز | قیمت | قیمت | قیمت | قیمت تانک الکتروفورز | فروش

الکتروفورز

الکتروفورز تکنیکی است که معمولاً در آزمایشگاه برای جداسازی مولکول های باردار مانند DNA، RNA و پروتئین ها، با توجه به اندازه استفاده می شود. وقتی جریان الکتریکی از آن عبور می کند، مولکول های باردار از طریق یک ژل حرکت می کنند. از طریق ژل جریان الکتریکی اعمال می شود به طوری که یک سر ژل بار مثبت دارد و سر دیگر آن بار منفی دارد. حرکت مولکول های باردار را مهاجرت می نامند. مولکول ها به سمت بار مخالف مهاجرت می کنند. بنابراین یک مولکول با بار منفی به سمت انتهای مثبت کشیده می شود. ژل الکتروفورز از یک ماتریس نفوذ پذیر، که تا حدودی خاصیت غربال گری دارد، تشکیل شده است که با عبور جریان الکتریکی از آن، مولکول ها می توانند از آن عبور کنند.مولکول های کوچکتر با سرعت بیشتری از طریق ژل مهاجرت می کنند و سرعت بیشتری نسبت به قطعات بزرگتر دارند؛ بنابراین مسافت کمتری را طی می کنند. در نتیجه مولکول ها از نظر اندازه از هم جدا می شوند.

انواع الکتروفورز

الکتروفورز کپیلاری(capillary)

ژل الکتروفورز

الکتروفورز کاغذی

الکتروفورز اسلب

الکتروفورز منطقه

ایمونوالکتروفورز

ایزوالکتروفوکوسینگ

بیشتر مولکول های بیولوژیکی دارای بار خالص در هر  PH  غیر از نقطه ایزوالکتریکی خود هستند و با سرعتی متناسب با تراکم بار خود مهاجرت می کنند. تحرک یک مولکول از طریق یک میدان الکتریکی به عوامل زیر بستگی دارد: قدرت میدان، بار خالص مولکول، اندازه و شکل مولکول، قدرت یونی و خصوصیات ماتریسی که مولکول از آن مهاجرت می کند (به عنوان مثال، ویسکوزیته، اندازه منفذ). پلی آکریل آمید و آگارز دو ماتریس پشتیبانی هستند که معمولاً در الکتروفورز استفاده می شوند. این ماتریس ها به عنوان محیط متخلخل عمل می کنند و مانند الگو مولکولی رفتار می کنند. آگارز اندازه منافذ زیادی دارد و برای جداسازی اسیدهای نوکلئیک و مجتمع های پروتئینی بزرگ مناسب است. پلی آکریل آمید اندازه منافذ کمتری دارد و برای جداسازی اکثر پروتئین ها و اسیدهای نوکلئیک کوچکتر ایده آل است.

ژل الکتروفورز و DNA

 الکتروفورز به شما امکان می دهد قطعات DNA با طول های مختلف را تشخیص دهید. DNA بار منفی دارد، بنابراین، وقتی جریان الکتریکی روی ژل اعمال شود، DNA به سمت الکترود دارای بار مثبت مهاجرت می کند. رشته های کوتاه DNA نسبت به رشته های طولانی تر و سریعتر از طریق ژل حرکت می کنند و در نتیجه قطعات به ترتیب اندازه مرتب می شوند. نشان گر ها (از جمله رنگ و مواد فلورسنت) باعث می شوند DNA روی ژل پس از جدا شدن دیده شود. DNA ها به صورت نوارهایی روی ژل ظاهر می شوند.  یک مارکر DNA با قطعات با طول مشخص معمولاً همزمان با نمونه ها از طریق ژل عبور می کند. با مقایسه نوارهای نمونه های DNA با نشانگر DNA ، می توانید طول تقریبی قطعات DNA را در نمونه ها مشخص سازید.

الکتروفورز ژل چگونه انجام می شود؟

تهیه ژل

ژل آگارز به طور معمول برای تجسم قطعات DNA استفاده می شود. غلظت آگارز مورد استفاده در ساخت ژل به اندازه قطعات DNA ای که با آنها کار می کنید بستگی دارد.هرچه غلظت آگارز بیشتر باشد، ماتریس متراکم تر و بالعکس است. قطعات کوچکتر DNA بر روی غلظت های بالاتر آگارز جدا می شوند در حالی که مولکول های بزرگتر به غلظت کمتری از آگارز نیاز دارند.برای تهیه ژل، پودر آگارز با بافر الکتروفورز مخلوط شده و تا دمای بالا گرم می شود تا تمام پودر آگارز ذوب شود.

سپس ژل مذاب در یک سینی ریخته گری ریخته می شود و در انتهای آن یک “شانه” قرار داده می شود تا چاه هایی برای نمونه قرار گیرد تا به داخل آن منتقل شود.هنگامی که ژل خنک و جامد شد (اکنون به جای شفاف بودن مات می شود) شانه برداشته می شود.اکنون بسیاری از افراد از ژل های پیش ساخته استفاده می کنند.سپس ژل درون مخزن الکتروفورز (تانک الکتروفورز) قرار می گیرد و بافر الکتروفورز داخل مخزن ریخته می شود تا زمانی که سطح ژل پوشانده شود. بافر جریان الکتریکی را هدایت می کند. نوع بافر استفاده شده به اندازه تقریبی قطعات DNA موجود در نمونه بستگی دارد.

آماده سازی DNA برای الکتروفورز

قبل از الکتروفورز یک رنگ به نمونه DNA اضافه می شود تا ویسکوزیته نمونه افزایش یابد که از شناور شدن آن به خارج از چاه ها جلوگیری می کند و به این ترتیب مهاجرت نمونه از طریق ژل قابل مشاهده است.مارکر DNA که به عنوان استاندارد اندازه یا نردبان DNA نیز شناخته می شود در اولین چاه ژل بارگیری می شود. قطعات موجود در مارکر دارای یک طول مشخص هستند بنابراین می توان از آنها برای کمک به تقریبی اندازه قطعات در نمونه ها استفاده کرد.سپس نمونه های DNA تهیه شده به درون چاه های باقیمانده ژل پیپت می شوند.با اطمینان از صحت جهت گیری ژل و الکترودهای مثبت و منفی، درب آن بر روی مخزن الکتروفورز قرار می گیرد (ما می خواهیم DNA از طریق ژل به انتهای مثبت منتقل شود).

جداسازی قطعات

سپس جریان الکتریکی روشن می شود تا DNA با بار منفی از طریق ژل به سمت سمت مثبت ژل حرکت کند.طول های کوتاهتر DNA سریعتر از طول های طولانی تر حرکت می کنند.فاصله ای که DNA در ژل مهاجرت کرده است می تواند با نظارت بر مهاجرت رنگ بافر در حال بارگیری، بصری ارزیابی شود.جریان الکتریکی به اندازه کافی روشن می ماند تا اطمینان حاصل شود که قطعات DNA به اندازه کافی در سراسر ژل حرکت می کنند تا آنها را از هم جدا کند، اما نه آنقدر طولانی که از انتهای ژل خارج شوند.

آشکار سازی نتایج

هنگامی که DNA به اندازه کافی از طریق ژل مهاجرت کرد، جریان الکتریکی خاموش شده و ژل از مخزن الکتروفورز خارج می شود.برای آشکار سازی DNA ، ژل با یک رنگ فلورسنت که به DNA متصل می شود رنگ آمیزی می شود و روی یک دستگاه روشنایی ماورابنفش قرار می گیرد که DNA رنگ آمیزی شده را به صورت نوارهای روشن نشان می دهد.در عوض، رنگ را می توان قبل از ریختن با ژل مخلوط کرد.اگر ژل به درستی اجرا شود، الگوی باند نشانگر DNA / اندازه استاندارد قابل مشاهده است.سپس می توان اندازه DNA موجود در نمونه خود را با تصور یک خط افقی که از نوارهای نشانگر DNA عبور می کند، مقایسه کرد. سپس می توانید اندازه DNA موجود در نمونه را با تطبیق آن ها با نزدیکترین باند نشانگر تخمین بزنید.

الکتروفورز پروتئین

الکتروفورز پروتئین یک روش آزمایشگاهی استاندارد است که توسط آن مولکول های پروتئین باردار از طریق یک حلال توسط یک میدان الکتریکی منتقل می شوند.اشکال مختلفی از الکتروفورز ژل پلی آکریل آمید (PAGE) وجود دارد و هر فرم می تواند انواع مختلفی از اطلاعات را در مورد پروتئین های مورد علاقه ارائه دهد. دناتوراسیون و احیا سدیم دودسیل سولفات PAGE  (SDS-PAGE)  با سیستم بافر ناپیوسته، پرکاربردترین تکنیک الکتروفورز است و پروتئین ها را از نظر جرم جدا می کند. صفحه دو بعدی (۲ بعدی) پروتئین ها را با توجه به نقطه ایزوالکتریک بومی در بعد اول و با جرم در بعد دوم جدا می کند.

SDS-PAGE پروتئین ها را در وهله اول از نظر جرم جدا می کند زیرا ماده شوینده یونی SDS غیرقطعی شده و به پروتئین ها متصل می شود تا بار منفی آنها به طور یکنواخت ایجاد شود. بنابراین، هنگامی که یک جریان اعمال می شود، تمام پروتئین های متصل به SDS در یک نمونه از طریق ژل به سمت الکترود دارای بار مثبت مهاجرت می کنند. پروتئین هایی که جرم کمتری دارند به دلیل اثر الک شدن ماتریس ژل، با سرعت بیشتری از طریق ژل عبور می کنند. پس از جداسازی توسط الکتروفورز، پروتئین ها را می توان در یک ژل با رنگ های مختلف شناسایی کرد، برای شناسایی توسط لکه های وسترن و / یا برش داده شده بر روی غشا منتقل و برای تجزیه و تحلیل توسط طیف سنجی جرمی استخراج کرد. بنابراین الکتروفورز ژل پروتئین یک گام اساسی در بسیاری از انواع تجزیه و تحلیل پروتئومیکس است.

تانک الکتروفورز

برای انجام الکتروفورز ژل پروتئینی ، ژل و بافر پلی آکریل آمید باید در یک محفظه الکتروفورز قرار گیرد که به منبع تغذیه متصل است و برای هدایت جریان از طریق محلول بافر طراحی شده است. با استفاده از جریان، مولکول های کوچکتر با سرعت بیشتری مهاجرت می کنند و مولکول های بزرگتر از طریق ماتریس ژل با سرعت کمتری مهاجرت می کنند. طرح های متعدد محفظه ژل وجود دارد. انتخاب تجهیزات معمولاً بر اساس این فاکتورها انجام می شود: ابعاد کاست ژل، در انتخاب طرح تانک الکتروفورز بیشتر از سایرین مرتبط است.ماهیت هدف و نیازهای تفکیک ژل مربوطه و اینکه آیا یک ژل پیش ساخته یا دست ساز و سیستم الکتروفورز عمودی یا افقی انتخاب شده است نیز در انتخاب تانک الکتروفورز موثر است.الکتروفورز، مخازن ژل و منابع تغذیه برای SDS PAGE و Agarose Gels اکنون در دسترس هستند. مخازن ژل و منابع تغذیه از شرکت Labnet ،Benchmark  و MTC-Bio برای رفع نیازهای مختلف شما موجود است. الکتروفورز ، مخازن ژل و منابع تغذیه موجود برای نتایج دقیق و قابل تکرار و طول عمر محصول قابل اطمینان و کارآمد هستند. الکتروفورز، مخازن ژل و منبع تغذیه متفاوت فواید و کاربردهای مختلفی دارند.

تانک الکتروفورز، جعبه ای شفاف می باشد. درون تانک تیغه هایی قرار دارد که امکان قرار دادن صفحه ژل روی آن وجود دارد

تانک الکتروفورز عمودی

آنژیوگرافی، ساترن­‌بلات و نورترن­‌بلات تکنیک های جداسازی ماکرومولکول ها از جمله DNA، RNA و پروتئین،  هستند که برای انجام عملیات، از تانک الکتروفورز عمودی استفاده می شوند. این تانک ها صورت یک طرفه و دوطرفه به فروش می رسند. درمقایسه با تانک یک طرفه، تانک دوطرفه حجم زیاد تری از بافر نیاز دارد.

تانک الکتروفورز افقی

عملکرد تانک افقی همانند تانک عمودی است. فقط امکان بارگذاری نمونه ها به صورت افقی را به کاربر می دهد.

نکاتی درمورد تانک الکتروفورز

تانک های الکتروفورز در ابعاد مشخص و یا به صورت سفارشی به فروش می رسند.

تانکی که استفاده می کنید، باید بتوان با استفاده از آن به رزولوشن  جداسازی بالایی دست یافت.

مواد به کار رفته در ساخت تانک باید از کیفیت خوبی برخوردار باشند و مانع هدر رفتن مواد و بافر ژل نشود.

منابع :

https://www.yourgenome.org/facts/what-is-gel-electrophoresis#:~:text=Electrophoresis%20is%20a%20technique%20commonly,like%20DNA%2C%20according%20to%20size.&text=An%20electric%20current%20is%20applied,charged%20molecules%20is%20called%20migration.

https://www.genome.gov/genetics-glossary/Electrophoresis#:~:text=Electrophoresis%20is%20a%20laboratory%20technique,move%20faster%20than%20larger%20molecules.

https://byjus.com/chemistry/types-of-electrophoresis/

https://www.biocompare.com/Lab-Equipment/Electrophoresis-Equipment/

https://www.pipette.com/electrophoresis-gel-tanks-power-supplies

https://www.thermofisher.com/ir/en/home/life-science/protein-biology/protein-biology-learning-center/protein-biology-resource-library/pierce-protein-methods/overview-electrophoresis.html#:~:text=What%20is%20protein%20electrophoresis%3F,rapid%2C%20and%20sensitive%20analytical%20tool.

اوج آزما پلاست ارائه دهنده انواع تانک الکتروفورز است. جهت کسب اطلاعات بیشتر از قیمت و خرید با ما تماس بگیرید (اینجا کلیک کنید).